Nedströms reningsprocess av vaccin mot svindiarré

Diarré är en av de tre stora sjukdomarna som har orsakat stora ekonomiska förluster för grisindustrin i Kina. Det finns många faktorer som orsakar diarré hos grisar, och de virala faktorerna är de allvarligaste. Grisar i alla åldrar kan smittas, särskilt diande smågrisar, och dödligheten efter infektion kan nå mer än 50 %. Porcint epidemiskt diarrévirus (PEDV) och porcint transmissibelt gastroenteritvirus (TGEV) är utbredda i världen och de två virusen kan infekteras var för sig eller i kombination. För närvarande finns det inga specifika läkemedel för att behandla PEDV och TGEV, och förebyggande och kontroll av svindiarré är huvudsakligen kommersiella vacciner.

Traditionella vacciner mot svinepidemidiarré inkluderar huvudsakligen helvirusinaktiverat vaccin och levande försvagat vaccin. Kliniskt används vanligen PEDV- och TGEV-tandeminaktiverat vaccin eller försvagat vaccin, och PEDV-, TGEV- och svinrotavirus (RV) trippelinaktiverat vaccin eller försvagat vaccin, mestadels PEDV- och TGEV-tandemvaccin.

För närvarande finns det många vacciner mot svinepidemidiarré i Kina.

Produktionsprocessen för inaktiverade och försvagade vacciner är likartade, huvudsakligen inklusive fem steg av patogenodling, patogeninaktivering eller försvagad patogenextraktion och rening, vaccinberedning och förpackning och vaccinets kvalitetskontroll. Denna artikel introducerar huvudsakligen proceduren för patogenrening.

Klargörande

Syftet med förtydligandet är att säkerställa avlägsnandet av cellrester och andra stora partikelaggregat. I cellkulturproduktionen av en mängd olika gift, förutom att innehålla ett stort antal viruspartiklar, finns det många cellvävnadsrester och metaboliska produkter och andra föroreningar, vilket gör giftet i ett tillstånd av grumligt eller halvmolnigt, det direkta Användning av denna giftkoncentrationsoperation kommer snart att göra ultrafiltreringsmembranet blockerat och kan inte slutföra koncentrationen av giftet, vilket resulterar i ultrafiltreringsmembranskrot. Innan giftet koncentreras måste det därför först klarnas, vilket vanligtvis görs genom låghastighetscentrifugering och membranfiltrering. Det bör noteras att när man använder membranseparationsteknik, på grund av att membranmaterialet ofta har elektronegativitet eller hydrofoba grupper, är det nödvändigt att undersöka om membranets material har adsorption till viruspartiklarna.

Ett effektivt klarningssteg kräver en kombination av hög kapacitet för avlägsnande av fasta partiklar och högt produktutbyte, enkel förstärkning och skydd av senare nedströms driftenheter. För närvarande används djupfilter för klarningsoperation.

Men när odlingsskalan är för stor kommer ett stort antal djupa filtermembran att krävas, vilket resulterar i en avsevärd ökning av kostnaden för förbrukningsvaror. Samtidigt kommer cellkulturens höga täthet att minska belastningen på det djupa filtermembranet, vilket resulterar i ökade kostnader och överdriven produktutspädning.

Mikrofiltreringsmetoden använder huvudsakligen tangentiell flödesfiltreringsanordning, och membrankomponenterna är platta membrankassetter och ihåliga fibrer. Tangentiell flödesfiltrering (TFF) drivs av den transmembrana tryckskillnaden. Ämnen och föroreningar som är mindre än membranets porstorlek passerar genom membranet, medan föroreningar som celler med större partiklar fångas. Porstorleken på membranet som används för mikrofiltrering är {{0}},45/0,22μm. Tangentiellt flödesmikrofiltrering av ihåliga fibrer kan direkt bearbeta vätska med högt fast innehåll, såsom cellodlingsmedium med hög densitet, kan eliminera centrifugerings- och förfiltreringssteg med färre steg och enkel drift, membranet kan användas upprepade gånger genom rengöring, minska utrustningsinvesteringar och drift kostnader, i linje med kraven för modulär automatiserad produktion.

Koncentration och rening

Efter ett preliminärt klargörande innehåller virusodlingsmediet fortfarande ett stort antal föroreningar, inklusive defekta partiklar, virusskal, cellgift, medium, serum och cellfragment etc. Om dessa föroreningar injiceras i djur kommer de inte bara att påverka effekten av vaccinet, men också orsaka ett starkt immunsvar hos värden, och till och med leda till att de vaccinerade djuren dör. Därför behövs koncentration och rening för att avlägsna föroreningar såsom heteroproteiner och cellfragment, förstärka och inducera effektiva immunsvar, minska mängden vaccin som används och minska biverkningar.

Principen för virusrening: att upprätthålla den biologiska aktiviteten och smittsamheten hos viruset som utgångspunkt, att avlägsna virusföroreningar och extrahera virusets höga renhet.

För närvarande är de huvudsakliga koncentrations- och reningsmetoderna som används vid storskalig produktion ultrafiltrering.

Ultrafiltreringsmetod, använder huvudsakligen tangentiellt flöde ultrafiltreringsanordning, ihålig fiberfiltreringssystem och annan filtreringsutrustning, under normala omständigheter kan tillämpningen av ultrafiltreringsmetoden göra att viruset koncentreras mer än 100 gånger, borttagningshastigheten för heteroprotein upp till 99%. Bland dem har hålfibermembranfiltreringsteknik fördelarna med mild och låg skjuvkraft, enkel pluggning, flexibel drift, lång livslängd och låg kostnad och enkel förstärkning, så det rekommenderas att välja ihålig fiber för viruskoncentration och rening.

När ultrafiltreringsmetod används för koncentration och rening är det mycket viktigt att välja lämplig membranporstorlek, som direkt bestämmer effektiviteten och kvaliteten på koncentrationen. Å ena sidan är det nödvändigt att välja membranöppningen för att effektivt fånga målmolekylerna för att säkerställa utbytet, och å andra sidan bör borttagningseffekten och bearbetningshastigheten för heteroproteiner beaktas fullt ut. Därför är den bästa principen att välja membranet med den största porstorleken som kan fånga målmolekylen och försöka välja filtermembranet med enhetlig porstorleksfördelning.

Porcint Epidemic diarrheavirus (PEDV) och transmissibelt gastroenteritvirus (TGEV) är båda koronavirus, som är polymorfa sfärer, med upp och ner spikliknande spikar, i diameter från 60 till 190 nm. Rotavirussjukdom är en zoonotisk sjukdom där rotavirus (RV) har ett hjulliknande utseende och är cirka 70 nm i diameter. Dessa tre virus kan i allmänhet fångas upp med hjälp av 100-750kd aperture ultrafiltreringsmembran.

Guidling Technology är ett nationellt högteknologiskt företag med fokus på bioläkemedel, cellodling, rening och koncentration av biomedicin, diagnos och industriella vätskor. Vi har framgångsrikt utvecklat centrifugalfilteranordningar, ultrafiltrerings- och mikrofiltreringskassetter, virusfilter, TFF-system, djupfilter, ihåliga fibrer, etc. Som fullt ut uppfyller tillämpningsscenarierna för bioläkemedel, cellodling och så vidare. Våra membran och membranfilter används i stor utsträckning vid koncentrering, extraktion och separation av förfiltrering, mikrofiltrering, ultrafiltrering och nanofiltrering. Våra många produktlinjer, från små laboratoriefiltrering för engångsbruk till produktionsfiltreringssystem, sterilitetstestning, fermentering, cellodling och mer, möter behoven för testning och produktion. Guidling Technology ser fram emot att samarbeta med dig!