Guidling Technology tar dig att lära dig den enkla och effektiva metoden för avsaltning och koncentration

Proteiner behöver ofta avsaltas efter separation och rening, och dessa salter härrör huvudsakligen från olika joner i levande organismer (t.ex. natriumjoner, kaliumjoner, kloridjoner etc.) samt buffertsalter i extrakten, salter i elueringsmedel och saltkomponenter av vissa denatureringsmedel som används för experiment. Hög koncentration av salt kan påverka aktiviteten och stabiliteten hos proteiner såväl som deras interaktioner med andra molekyler, generera störande signaler eller minska noggrannheten i mätningar i efterföljande analytiska metoder som elektrofores, masspektrometri och kristallografiska studier. Därför är det mycket nödvändigt att avsalta de renade proteinerna efter separation, och de huvudsakliga avsaltningsmetoderna som ofta används är membran (dialys och ultrafiltrering) och gelfiltreringskromatografi. Dessutom kan avsaltning i vissa fall även åstadkommas genom utspädning.

 

Dialysavsaltning, på grund av den långa cykeln och behovet av ett stort antal ersättningsvätska, har dess tillämpning varit mycket begränsad, och den används mindre i industrin, men används huvudsakligen delvis i laboratoriet, laboratoriet ersätts också gradvis med ultrafiltreringsrör /ultrafiltreringskopp.

 

Den huvudsakliga membranseparationsteknologin som används i processen för proteinavsaltning och koncentration är ultrafiltrering. Ultrafiltrering är en membranseparationsteknologi med hög effektivitet, låg energiförbrukning, ingen fasförändring, inget behov av att lägga till några kemiska reagenser, enkel användning, milda förhållanden, förmågan som bättre kan upprätthålla aktiviteten hos biologiska makromolekyler, hög återvinningshastighet och andra fördelar , och dess användning vid proteinseparation och rening har unika fördelar.

 

Ultrafiltrering är en membranfiltreringsmetod som använder ett poröst membran som separationsmedium och förlitar sig på tryckskillnaden mellan de två sidorna av membranet som drivkraften för att separera ämnen med olika molekylvikter i lösning, vilket spelar en roll i avsaltning, koncentration och rening. Detta är en ny metod som utvecklats på senare år och som är mest lämpad för koncentration eller avsaltning av biologiska makromolekyler, speciellt proteiner och enzymer. Nyckeln till tillämpningen av ultrafiltrering är valet av membran, olika typer och specifikationer av membranet, har skillnaden i vattenflödeshastighet, molekylviktsavskärning och andra parametrar, det måste väljas enligt de relevanta arbetsbehoven. Dessutom har formen av ultrafiltreringsanordning, löst ämnes sammansättning och egenskaper, lösningskoncentration etc. en viss inverkan på effekten av ultrafiltrering.

 

Tillämpningen av ultrafiltreringsteknik för avsaltning och koncentrering av proteiner i reningsprocessen av proteiner kännetecknas av dess lämplighet för behandling av stora mängder vätskor från några hundra till några tusen liter med fördelarna av enkel drift, tidsbesparande och hög proteinåtervinningshastighet. Ultrafiltreringsmetoden mognas från ultrafiltreringsrör för laboratoriebearbetning av mikrovolymer, ultrafiltreringskoppar för småvolymsbearbetning och ultrafiltreringssystem för industriell användning.

 

Ultrafiltrering är uppdelat i direkttrycksultrafiltrering och tangentiell flödesfiltrering, och för närvarande används tangentiell flödesfiltrering huvudsakligen inom industrin, som används i stor utsträckning vid avsaltning och buffertbyte.

 

Följande är ett exempel på tillämpningen av Guidling Technologys ultrafiltreringsmembrankassetter vid proteinavsaltning och koncentration.

 

Vi använde en {{0}}.11㎡ 10 kd porstorleksmembrankassett (G01100010K) för att avsalta och koncentrera 500 ml PEG-modifierad tillväxthormonlösning i en koncentration av 0,2 mg/ml. Under hela ultrafiltreringsprocessen undersöktes avsaltningshastigheten, proteinåtervinningshastigheten, membranflödesfeltillståndet och vattenflödesåtervinningshastigheten.

 

Före och efter användningen testade vi vattenflödet i membrankassetten separat, och återvinningsgraden för membrankassetterna nådde 98 % under förutsättningen att samma matningshastighet, matningstryck och återflödestryck bibehölls.

 

Hela processen bearbetade totalt 2L material och tog 40min, 0-5min var koncentrationsprocessen, 5-35min var vätskebytesprocessen och 35-40min var överkoncentrationsprocessen. Under hela ultrafiltreringsprocessen stabiliserades TMP mellan 0,7-0,8 bar, matningshastigheten var konstant och det genomsnittliga materialflödet var 27 LMH.

 

2L materialkoncentrerat vätskebyte till 60mL, ca 33 gånger koncentrerat, avsaltningshastigheten når 99%, återvinningsgraden når 80%, efter en tvätt, en ökning med 50mL vätska, den totala återvinningen på 88%, industriell produktion enl. dödvolymen av rörledningsberäkningar, så långt det är möjligt för att öka antalet gånger av topptvätt, allmän topptvätt 3 gånger kan återvinnas helt.

 

Guidling Technology-membrankassetter är gjorda av inerta material av medicinsk kvalitet med stark korrosionsbeständighet och tål stark alkalisk rengöring; Användningen av en automatiserad tillverkningsprocess säkerställer produktens kontinuitet och kvalitetstillförlitlighet, högre mekanisk hållfasthet, motstånd mot mottryck och upprepad sköljningsprestanda; den har superhydrofilicitet, vilket kan ge membranet högre flöde och lägre proteinadsorption; vi har även en optimerad flödeskanaldesign med ett mindre tryckfall som underlättar materialöverföring och avsevärt förkortar filtreringstiden.

 

Våra membrankassetter finns i ett brett utbud av porstorlekar, från 1kd till 1000kd. Bland dem kan 1-10kd ultrafiltreringsmembrankassetter användas för avsaltning och avlägsnande av pyrogen; 30kd ultrafiltreringsmembrankassetter kan användas för monoklonal antikroppskoncentration och buffertbyte; samtidigt kan våra hålfiberprodukter också användas för koncentration och ersättning av biologiska läkemedel, med porstorlekar på 100kd, 300kd och 500kd, som huvudsakligen används för ett stort antal tillämpningar i vaccinprodukter.

 

Guidling Technology är ett nationellt högteknologiskt företag med fokus på bioläkemedel, cellodling, rening och koncentration av biomedicin, diagnos och industriella vätskor. Vi har framgångsrikt utvecklat centrifugalfilteranordningar, ultrafiltrerings- och mikrofiltreringskassetter, virusfilter, TFF-system, djupfilter, ihåliga fibrer, etc. Som fullt ut uppfyller tillämpningsscenarierna för bioläkemedel, cellodling och så vidare. Våra membran och membranfilter används i stor utsträckning vid koncentrering, extraktion och separation av förfiltrering, mikrofiltrering, ultrafiltrering och nanofiltrering. Våra många produktlinjer, från små laboratoriefiltrering för engångsbruk till produktionsfiltreringssystem, sterilitetstestning, fermentering, cellodling och mer, möter behoven för testning och produktion. Guidling Technology ser fram emot att samarbeta med dig!