Underhåll och användningsmetod för ultrafiltreringsrör

Underhåll och användningsmetod för ultrafiltreringsrör

Funktion för ultrafiltreringsrör:

1) Koncentration; 2) Avsaltning; 3) Byt ut buffert; 4) Det har effekten av partiell rening.

1. Det nya ultrafiltreringsröret kan användas direkt utan annan behandling;

2. Ultrafiltreringsröret kan inte steriliseras vid hög temperatur;

3. Behandling av ultrafiltreringsrör vid byte av koncentrerat protein

Ultrafiltreringsröret kan återanvändas. Blötlägg den i 0.1M NaOH i 1-2 timmar, tvätta den med vatten och tvätta den sedan med relevant lösning (steriliserat vatten eller PBS) på centrifugen i 3 gånger, som kan användas för att koncentrera nytt protein;

4. Behandling av normalt placerat ultrafiltreringsrör

För det ofta använda ultrafiltreringsröret, blötlägg det i 0.1M NaOH i 1-2 timmar, tvätta det med vatten och blötlägg det i steriliserat vatten. Se till att hålla filtermembranet vått och förhindra att bakterier växer;

5. Behandling av ultrafiltreringsrör placerat under lång tid

Om ultrafiltreringsröret inte används under en längre tid, blötlägg det i 0.1M NaOH i 1-2 timmar, tvätta det med vatten och blötlägg det i 20 procent etanol för förvaring. Se till att hålla filtermembranet vått och förhindra att bakterier växer;

6. Centrifugalhastighet som används för ultrafiltreringsrör

Centrifugalhastigheten är i allmänhet 4000 rpm (3000g rekommenderas generellt, och maxhastigheten får inte överstiga 4000g). Efter centrifugering i 5-8 minuter kan 4 ml prov koncentreras till mindre än 1 ml till dussintals mikroliter; Om hastigheten är för hög kommer målproteinet att falla av, vilket resulterar i förlust av målprotein; Låg hastighet, tidskrävande och låg arbetseffektivitet;

7. Försiktighetsåtgärder när pistolhuvudet sträcker sig in i ultrafiltreringsröret

När man tillsätter proteinlösning eller buffert till ultrafiltreringsröret kan det blå pistolhuvudet användas; Men när det koncentrerade målproteinet absorberas från botten av ultrafiltreringsröret måste det gula pistolhuvudet användas; När pistolhuvudet sätts in i ultrafiltreringsröret måste det förhindras från att vidröra filtermembranet för att undvika punktering av filtermembranet;

8. Minska proteinadsorptionsförlusten i ultrafiltreringsröret

Membranet i ultrafiltreringsröret kan adsorbera protein, vilket kommer att minska målproteinet med cirka 30 procent; För att minska proteinförlusten, efter att ha absorberat målproteinlösningen, rengör botten av ultrafiltreringsröret med proteinbuffert för att tvätta det mesta av proteinet som adsorberas av filtermembranet och minska förlusten av målprotein; Om det renade proteinet är koncentrerat, var uppmärksam på att den koncentrerade volymen inte bör vara för liten; I allmänhet, oavsett hur centrifugerad, kommer cirka 200 µL proteinlösning att kvarhållas vid botten;

9. Hur man definierar felet i ultrafiltreringsröret

Vid normal användning, när filtermembranet inte är punkterat, innehåller den koncentrerade proteinlösningen inget protein eller mängden är mycket låg (inklusive målprotein), medan den första filtrerade lösningen innehåller målprotein indikerar det att filtermembranet är ogiltigt och måste bytas ut mot ett nytt ultrafiltreringsrör.